雞elisa檢測(cè)試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線做欠好的原因分析，剛剛觸摸Elisa實(shí)驗(yàn)，研討雞透明質(zhì)酸（HA）相關(guān)目標(biāo)的實(shí)驗(yàn)，做完雞透明質(zhì)酸（HA）實(shí)驗(yàn)后反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線的梯度都欠好。剛加完顯色劑的時(shí)分梯度還算明顯，但是顯色比較淺，跟著時(shí)刻延伸（大約6、7分鐘）往后梯度就不明顯了。停止反應(yīng)后測(cè)得的值梯度就沒有了。
為此，我公司技術(shù)員對(duì)雞elisa檢測(cè)試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線做不好的原因做出分析：
1、剛加完顯色劑時(shí)梯度明顯：顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的；
2、酶濃度太高，導(dǎo)致最終顯色結(jié)果都是高的；
3、包被-酶標(biāo)系統(tǒng)不匹配或許酶標(biāo)的非特異反應(yīng)太強(qiáng)，或許酶標(biāo)儀讀數(shù)規(guī)劃不夠；
4、樣本中有可以催化底物的物質(zhì)，沒洗下來(lái)；
5、建議：包被、酶標(biāo)重新做梯度，先用較低的濃度把梯度探究好，然后再優(yōu)化靈敏度，最終調(diào)出所需的靈敏度、線性規(guī)劃；
6、有條件的話，可以把酶免的蛋白系統(tǒng)移植到板式化學(xué)發(fā)光上，加完底物三分鐘讀數(shù)；
7、蛋白系統(tǒng)靈敏度夠的話，顯色十分鐘就差不多了；
8、酶是自己標(biāo)的這種情況的，HRP比例不要太高。
完好的雞elisa檢測(cè)試劑盒首要包含：
1、酶的底物；
2、已包被抗原或抗體的固相載體；
3、酶符號(hào)的抗原或抗體；
4、結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；
5、洗滌液；
6、陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品（定性測(cè)定中），參閱規(guī)范品和控制血清；
7、酶反應(yīng)停止液，常用的HRP反應(yīng)停止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的終究體積而異，在板式ELISA中一般選用2mol/L。
在線客服
電話咨詢
